蔬菜上农药残毒快速检测技术——酶抑制法检测有机磷和氨基甲酸酯类农药

1 前言
 
蔬菜是一种生长期短,茬口多的作物,它生长采收旺季 ,也是病、虫害发生旺季。特别是大棚蔬菜, 因温度高、湿度大、地块单一等多种因素 ,导致病、虫害更为严重。为提高蔬菜的产量和质量, 农民需要用化学农药防治病虫害 。我**已发布的《农药管理条例》中明确规定:“使用农药应当遵守**家有关农药安全、合理使用的规定 , 按照规定的用药量, 用药次数 , 用药方法和安全间隔期施药, 防止污染农副产品。剧毒、 高毒农药不得用于防治卫生害虫, 不得用于蔬菜、瓜果、茶叶和中草药材” 。但一些农民不按规定, 滥用农药。杀虫剂中 70%为有机磷农药, 而在我**生产使用的有机磷杀虫剂农药中 , 70 %为剧毒或高毒农药。农药如果使用不当, 非旦药效不好, 还会发生药害 , 污染环境, 造成人畜中毒。目前人们因吃蔬菜而引起农药中毒事故, 也多因农民违反规定在蔬菜上滥用高毒农药造成的。近年来蔬菜被农药污染的情况有增无减 ,甚**人们吃蔬菜时提心吊胆。
 
如何让大家吃上放心的蔬菜呢? 有关部门除了加强宣传,普及科学、合理使用农药知识, 提高使用者的素质, 逐渐调整农药品种结构, 减少剧毒、高毒农药药源 ,对剧毒、高毒农药实行限制政策等综合措施外, 还**加强监督、监测管理力度 ,加强对市场上蔬菜农药残留的监控是非常重要的。 在许多发达**家, 由于蔬菜生产基地相对集中, 蔬菜批发商将蔬菜运到销售地点后 ,即储存在仓库中,同时向地方政府所属的残留检测部门申请农药

残留检测, 检测部门有相对充分的时间对抽检的样本用气相色谱仪或其他分析仪器进行定性和定量分析 , 合格者 , 允许进入市场销售 ,不合格者,就地销毁。蔬菜上农药残留的抽样检测, 在许多发达**家早已制度化, 对农药残留量超标的蔬菜能有效的得以控制。我**的蔬菜生产相对分散,蔬菜要保持新鲜 ,即采即卖 , 由采收到市场销售 , 所经时间很短,不允许把从市场上所抽检的大量样本用气相色谱等分析仪器进行分析 , 而且这些精密的昂贵仪器在基层使用是不现实的, 因此**采用符合我**蔬菜产销特点的监测、 检测方法 ,在较短时间内检测较大量的样本。
 
酶抑制法(生化法)就是一种简便、灵敏、快速、经济的检测方法 ,在较短的时间得到检测结果 , 可及时对市场上含残毒的蔬菜进行监控。将一部分含农药残留量超标的蔬菜控制在交易市场之外, 让人们吃上相对安全的蔬菜, 避免农药中毒事故发生, 尽量减少农药残留对人们的危害。另外 , 在对蔬菜农药残留定性定量检测中, 减少在试验室用仪器分析中巨大的工作量:可先用酶抑制法在短时间内对大量抽检样本快速进行粗筛 , 筛选出有问题(抑制率≥70 %)的样本 , 再用气相色谱法定性、定量分析。在目前条件下 ,这是净化蔬菜市场的一种有效可行的方法。
2 农药快速检测 -生化法(酶抑制法)
 
2.1 检测原理 根据有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制昆虫中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酯酶的活性 , 造成神经传导介质乙酰胆碱的积累, 影响正常传导, 使昆虫中毒致


本要详细记录 , 如蔬菜种类、抽检地点、抽检
时间、蔬菜来源、批发商等。
2 .7  解释检测结果出现的反常现象
2 .7.1  假阳性的产生 普遍反映, 用速测
卡检测, 容易出现假阳性,其实速测卡的检测
原理与本方法介绍的原理是一样的, 用速测
卡容易出现假阳性 , 原因出在酶的活性上。
酶是一种生物物质 ,它需要在低温下保存, 速
测卡浸过酶的小纸片, 当放置一段时间后, 酶
的活性会降低或失去活性。实验证明, 保存在
0 ℃~ 5℃冰箱中的酶液 ,一周后 ,酶的活性会
降低 30 %~ 50 %, 而且酶的反应受环境人为
等诸多因素影响, 在这种情况下 ,用速测卡检
测 , 很容易出现假阳性。当酶的活性会降低
或失去活性时 ,酶在底物中不起作用, 底物不
能被水解 , 因此也无法与显色剂结合生成黄
色 , 这种阳性的产生不是由于农药的存在抑
制了酶的活性 , 而是酶本身就失去了活性造
成的。用酶抑制法(分光光度计检测, 由于操
作条件稳定, 酶的保存和使用都较规范 ,检测
中避免了假阳性的产生。  
2 .7.2  抑制率出现负值 结果中抑制率
偶尔出现负值 , 这是指在计算中样本的 As
(样本 3m in 后与 3min 前吸光值的差)比空
白值的 Ac(空白 3m in 后与 3min 前吸光值
的差)要大。造成的主要原因,一是操作中的
系统误差 ,从吸光值变化动态曲线可以看出 ,
酶分解底物、分解物再与显色剂结合, 这样的
动力学过程进行的是非常快的, 如果操作中
不够熟练就会产生人为的系统误差。另外 ,
同一种蔬菜, 由于不同次重复提取时所取蔬
菜样本的部位不同 ,这种较小的负值误差(-
10 %以下)是在允许范围之内,我们认为这种
情况下样本中无农药检出。
3  后语    
3 .1  快速检测是一种生物检测方法, 方法本
身是适应特殊要求而执行它的特殊任务。此
方法可对含农药残毒的蔬菜进行粗筛 , 将一
部分含农药残毒的蔬菜控制在市场之外, 避
免农药中毒事故发生, 让人们吃上相对放心
的蔬菜。    
3 .2  速测法操作简便、快速 、灵敏、经济 。样
本无需净化, 大大缩短了检测时间, 一个熟练
的检测人员 30min 可检测 6~ 7 个样本。
3 .3  此方法****的试剂是胆碱酯酶 , 应统
一标准, 选用对**内常用的有机磷和氨基甲
酸酯类农药(如甲胺磷等)较敏感以及活性较
高的胆碱酯酶。    
3 .4  此方法只能检测有机磷和氨基甲酸酯
类农药, 不适用于其他农药残毒检测 ,且不能
定性和定量。所以, 当用此方法检测出有残毒
问题的蔬菜时 ,如果要作为仲裁处理 ,应送到
有关部门进一步用气相色谱等仪器进行定性
和定量分析, 其结果方可作为**终结论性数
据。    
3 .5  此方法不适宜检测一些含辛辣物质的
蔬菜如萝卜、 韭菜以及一些如茭白、 蘑菇等
的 菌类蔬菜。对残留量愈高的蔬菜 , 测定
的误差愈小。在有机磷和氨基甲酸酯类农药
中仍有少部分农药品种对此方法不灵敏。
3 .6  此方法的灵敏度是有限的, 而且灵敏度
与酶的活性、 选择性以及影响检测的诸多因
素有关。但检测结果抑制率>70 %蔬菜肯定
某种有机磷或氨基甲酸酯类农药超过了**家
规定的残留限量标准。    
3 .7  不同型号的仪器测定结果应该是相同
的, 只是自动化程度的不同 , 但在使用一般比
色计时操作要熟练 , 并应增加样本测定的重
复,以保证测定结果的准确性。
3 .8  快速检测在全**开展推广应用时 , 检测
方法、仪器、试剂(酶、底物、显色剂)等都应规
范化 ,应举办专门培训班, 对操作人员进行技
术培训。    
3 .9  有关蔬菜市场管理部门应该制定相应
的惩处办法, 对超出标准(速测法检测中规定
的标准)蔬菜生产者、经营者以及批发商定出
惩处办法。